Recherche appliquée dans le traitement du cancer de la prostate par des cellules car - t modifiées par des récepteurs chimériques bispécifiques

Problèmes à résoudre 1. Identification d'un ou plusieurs antigènes spécifiques du cancer de la prostate par le dépistage immunohistochimique de coupes pathologiques, y compris PSMA, ROR - 1, PSMA - pdl1, cyr61, psca, lewisy, antigènes EGFR, etc. Construire le vecteur rétroviral plncx-psma-pdl1.car qui cible les récepteurs antigéniques hybrides chimériques spécifiques décrits ci - dessus, tels que PSMA - pdl1 - car, et le vecteur rétroviral plncx - luc2 qui porte la luciferase, et conditionner les virus correspondants à l'aide d'un kit d'emballage rétroviral. 3. Le virus plncx - luc2 infecte les cellules tumorales Hela, huh7, PC3, LNCaP, etc., et le virus plncx-psma-pdl1.car exprimant de manière stable la souche de cellules luc2 infecte les cellules T et les souches de cellules PSMA - pdl1 exprimant de manière stable sont criblées pour des expériences ultérieures. 4. Luciferase Bioluminescence détecte les effets tueurs in vitro des lymphocytes du sang périphérique humain (car - t) sur les cellules tumorales PSMA positives. 5. Le virus plncx - luc2 a été stabilisé avec la souche cellulaire de souris polymériques et l'inhibition in vivo de la croissance tumorale par les lymphocytes du sang périphérique humain (PBL - car) ou l'inhibition de la capacité métastatique tumorale par PBL - car a été détectée à l'aide d'un modèle de métastases pulmonaires artificielles PC3 chez les souris polymériques. Objectifs à atteindre 1. Identifier un ou plusieurs antigènes spécifiques du cancer de la prostate et les construire en récepteurs antigéniques chimériques (car) spécifiquement reconnus qui fourniront la base pour la prochaine étape du développement de cellules car - t. 2. Préciser l'activité ciblée et tueuse des cellules T modifiées par le récepteur chimérique de l'antigène (car) sur les cellules cancéreuses de la prostate et mener des expériences sur des animaux afin de fournir des conditions favorables à l'utilisation des cellules car - t pour la recherche clinique sur le cancer de la prostate. Application des cellules car - t modifiées par des récepteurs chimériques bispécifiques au traitement du cancer de la prostate Étude le cancer de la prostate (prostatecancer, PCA) met en danger la santé de la vie chez les hommes d'âge moyen à avancé. Siefel et d’autres données publiées dans la revue cacancerjclin en 2015 ont montré que l’incidence de l’apc aux États - Unis atteignait 26% en 2015, se classant au premier rang des taux de cancer et au deuxième rang des taux de mortalité avec 9%. L'incidence du cancer de la prostate dans notre pays est inférieure à celle des pays européens et américains, mais ces dernières années, avec le vieillissement de la population, l'évolution des habitudes de vie et la popularité progressive des examens physiques, l'incidence du cancer de la prostate a également augmenté, se classant au troisième rang des tumeurs malignes du système génito - urinaire masculin. L'apparition du cancer de la prostate est cachée, se développe à un stade intermédiaire à avancé, est sujette aux métastases, à la résistance aux médicaments et à d'autres problèmes difficiles, ce qui affecte gravement la qualité de vie et la longévité du patient. La détection précoce du cancer de la prostate et son traitement ont des implications importantes. La castration androgène ou la thérapie endocrinienne qui bloque les androgènes au niveau du récepteur des androgènes est le traitement standard pour le cancer de la prostate avancé. Mais 80 à 90% des patients atteints d’un cancer de la prostate avancé passent d’un cancer de la prostate androgène - dépendant à un cancer de la prostate Hormono - dépendant plus agressif, c’est - à - dire un cancer de la prostate résistant aux androgènes qui se développe après une rechute après un traitement de castration chez les mâles, 12 à 18 mois après le traitement endocrinien. Une fois que la tumeur présente des propriétés Hormono - dépendantes, elle deviendra très résistante à tous les agents chimiothérapeutiques et moins efficace pour tout autre traitement. Un traitement ciblé plus puissant et plus efficace devient donc la prochaine option incontournable pour lutter contre le cancer de la prostate. Les récepteurs antigéniques chimériques (car) sont formés par la fusion d'une région de ciblage dérivée d'anticorps avec une région de signalisation des cellules T, ce qui confère aux cellules T une spécificité antigénique lorsqu'elles expriment les car, ce qui les cible pour se lier et tuer les cellules tumorales. Actuellement, la thérapie par les cellules car - t est bien efficace dans les tumeurs dérivées des cellules B, et les cellules car - t jouent théoriquement un rôle similaire dans les tumeurs solides, mais doivent être explorées et améliorées davantage. Cependant, le traitement des tumeurs solides à cellules car - t est confronté à trois défis majeurs (1) manque d'antigènes spécifiques appropriés liés à la tumeur (2) Les cellules car - t ne s'enrichissent pas facilement dans la région tumorale (3) immunosuppression du microenvironnement tumoral sur les cellules car - t. Une raison importante pour laquelle les stratégies de thérapie cellulaire car - t peuvent obtenir des résultats idéaux dans les tumeurs du sang est qu'il existe des cibles spécifiques pour les tumeurs du sang, telles que l'expression de CD19 dans les tumeurs malignes du sang à cellules B atteint près de 100%, alors qu'il est difficile de trouver des antigènes spécifiques dans les tumeurs solides comme les tumeurs du sang la plupart des antigènes sont exprimés relativement haut sur les cellules tumorales, les cellules normales auront également une petite quantité d'expression, Il est donc difficile d'éviter une destruction non spécifique des cellules normales. L'hétérogénéité est l'une des caractéristiques les plus importantes des tumeurs solides, ce qui signifie également que même les tumeurs d'un site du même patient n'expriment pas toutes le même antigène lié à la tumeur. Même sur une seule lésion tumorale, aucun antigène cible ne peut couvrir toutes les cellules tumorales. Si une tumeur solide est traitée avec une seule cible de cellules car - t, la caractéristique théorique de la forte hétérogénéité de la tumeur solide détermine sa récurrence inévitable ou son incapacité à être éradiquée. La sélection d'antigènes spécifiques à la tumeur est donc le plus grand goulot d'étranglement pour le traitement des tumeurs solides par car - t.